水浴锅在DNA片段的纯化与回收中的应用

1．从琼脂糖凝胶中回收DNA片段

(1)柱平衡步骤：向吸附柱CB2中（吸附柱放入收集管中）加入500μl的平衡液BL，12000rpm离心1min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。

(2)将单一的目的DNA条带从琼脂糖凝胶中切下（尽量切除多余部分）放入干净的离心管中，称取重量。

(3)向胶块中加入等倍体积溶液PC，50℃水浴锅放置10min，其间不断温和地上下翻转离心管，以确保胶块充分溶解。

(4)将上一步所得溶液加入一个吸附柱CB2中（吸附柱放入收集管中），12000rpm离心1min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱CB2放入收集管中。

(5)向吸附柱CB2中加入500μl漂洗液PW，12000rpm离心1min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱CB2放入收集管中。

(6)重复操作步骤(5)。

(7)将吸附柱CB2放入收集管中，12000rpm离心2min，尽量除去漂洗液。将吸附柱置于室温放置数分钟，晾干。

(8)将吸附柱CB2放入一个干净的离心管中，向吸附膜的中间位置悬空滴加适量的洗脱缓冲液EB，室温放置2min。

(9)12000rpm离心2min，收集DNA溶液。

2．从PCR反应液或酶切反应液中回收DNA

(1)柱平衡步骤：向吸附柱CB2中（吸附柱放入收集管中）加入500μl的平衡液BL，12000rpm离心1min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。

(2)估计PCR反应液或酶切反应液的体积，向其中加入等倍体积溶液PC，充分混匀。

(3)将上一步所得溶液加入一个吸附柱CB2中（吸附柱放入收集管中），室温放置2min，12000rpm离心1min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放入收集管中。

(4)向吸附柱CB2中加入500μl漂洗液PW，12000rpm离心1min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱CB2放入收集管中。

(5)重复操作步骤(4)。

(6)将吸附柱CB2放回收集管中，12000rpm离心2min，尽量除去漂洗液。将吸附柱CB2室温放置数分钟，晾干。

(7)将吸附柱CB2放入一个干净的离心管中，向吸附膜中间位置悬空滴加适量的洗脱缓冲液EB，室温放置2min。

(8)12000rpm离心2min，收集DNA溶液。